培養(yǎng)基制備(按1000ml計)
1、 營養(yǎng)肉湯(Nutrient broth)培養(yǎng)基:牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,加水至1000ml,pH7.2~7.4
2、 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(Nutrient agar)培養(yǎng)基: 牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,瓊脂15~20g,加水至1000ml,pH7.2~7.4
3、 肉汁葡萄糖培養(yǎng)基: 牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,葡萄糖20g,瓊脂15~20g,,pH7.2~7.4
4、 察氏培養(yǎng)基:NaNO32g,K2HPO4 1g,KCl 0.5g,MgSO4·7H2O 0.5g,FeSO4·7H2O 0.01g,蔗糖30g, 瓊脂15~20g,加水至1000ml,pH自然
5、 高氏一號培養(yǎng)基:可溶性淀粉20g,KNO31g,NaCl 0.5g, K2HPO4 0.5g, MgSO4·7H2O0.5g,FeSO4·7H2O 0.01g, 瓊脂20g,加水至1000ml,pH7.2~7.4。此培養(yǎng)基適用于多數(shù)放線菌,孢子生長良好,宜保藏菌種。制法:先用少量冷水將淀粉調(diào)成糊狀,再取700ml水盛于燒杯中,在電爐上加熱,沸騰時邊攪拌邊將淀粉糊倒入,待透明后再將其他成分加入,最后補足水分至1000ml.
6、 無碳基礎(chǔ)培養(yǎng)基(NH4)2SO4 5g,KH2PO4 1g,NaCl 0.1g, MgSO4·7H2O 0.5g,CaCl2 0.1g,酵母膏0.2g, 加蒸餾水至1000ml,pH6.5.加2%水洗瓊脂即成固體培養(yǎng)基.于6.86×104Pa壓力下滅菌20min.此培養(yǎng)基適用于測定酵母菌對碳源的利用(加待測碳源2%).
7、 無氮基礎(chǔ)培養(yǎng)基:葡萄糖20g, K2HPO4 1g, MgSO4·7H2O 0.5g,酵母膏 0.1g或20%豆芽汁20ml,水洗瓊脂20g,加無氨蒸餾水至1000ml.pH6.5. 于6.86×104Pa壓力下滅菌20min.此培養(yǎng)基適用于測定酵母菌對氮源的利用(加待測氮源0.5%).
8、 營養(yǎng)缺陷型篩選用培養(yǎng)基
⑴ 普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基
⑵ 加倍營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基: 牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,加水至500ml,pH7.2
⑶ Vogel 50×(即濃縮50倍): MgSO4·7H2O 10g,檸檬酸100g,NaNH4HPO4·4H2O175g,KH2PO4·2H2O599.88g,K2HPO4·3H2O656.31g,加蒸餾水至1000ml.配置時先加水500ml,加熱使藥品溶解后,再定容1000ml.配好后放入冰箱備用.
⑷ 固體基本培養(yǎng)基:Vogel 50×20ml,葡萄糖20g,水洗瓊脂20g,加蒸餾水至1000ml,pH7.0,
⑸ 2氮液體基本培養(yǎng)基:K2HPO47g,KH2PO4 3g,檸檬酸納·3H2O 5g,MgSO4·7H2O 0.1g,(NH4)2SO4 2g,葡萄糖20g,加蒸餾水至1000ml,pH7.0, 于4.9×104Pa壓力下滅菌20~30min.
⑹ 無氮液體基本培養(yǎng)基:在⑸的配方中除去(NH4)2SO4即可.
⑺ 混合氨基酸和混合維生素的配置:將氨基酸分為七組(如下表),其中六組各有6種氨基酸,每種氨基酸等量研細(xì),充分混勻.若所選的氨基酸為DL型,則用量加倍.第七組只有一中氨基酸.第八組為混合維生素.
Ⅰ 賴氨酸 精氨酸 甲硫氨酸 半胱氨酸 胱氨酸 嘌呤
Ⅱ 組氨酸 精氨酸 蘇氨酸 谷氨酸 天冬氨酸 嘧啶
Ⅲ 丙氨酸 甲硫氨酸 蘇氨酸 羥脯氨酸 甘氨酸 絲氨酸
Ⅳ 亮氨酸 半胱氨酸 谷氨酸 羥脯氨酸 異亮氨酸 纈氨酸
Ⅴ 苯丙氨酸 胱氨酸 天冬氨酸 甘氨酸 異亮氨酸
Ⅵ 色氨酸 嘌呤 嘧啶 絲氨酸 纈氨酸 酪氨酸
Ⅶ 脯氨酸
Ⅷ 維生素B1 維生素B2 維生素B6 泛酸 對氨基苯甲酸 煙堿酸及生物素
因脯氨酸容易潮解,所以單獨列為第七組.
把維生素B1、B2、B6、泛酸、對氨基苯甲酸(BAPA)、煙堿酸及生物素等量研細(xì),充分混勻,配成混合維生素為第八組。